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Tipo: Dissertação
Título: Estudo de proteínas antigênicas do Treponema pallidum
Título(s) alternativo(s): Study of Treponema pallidum antigen proteins
Autor(es): Queiroz, Júlio Henrique Ferreira de Sá
Primeiro Orientador: Simionatto, Simone
metadata.dc.contributor.advisor-co1: Pereira, Rodrigo Matheus
metadata.dc.contributor.referee1: Marchioro, Silvana Beutinger
metadata.dc.contributor.referee2: Ribeiro, Suzana Meira
Resumo: A incidência de sífilis tem aumentado de forma preocupante nas últimas décadas, com uma estimativa de 6 milhões de novos casos por ano no mundo. O diagnóstico da sífilis continua um desafio, devido à dificuldade de cultivo in vitro do Treponema pallidum. Nos últimos anos, novos testes treponêmicos têm sido desenvolvidos, utilizando antígenos recombinantes de T. pallidum. Esta abordagem conferiu uma maior especificidade e sensibilidade para a triagem dos pacientes com sífilis. No entanto, a busca por novos antígenos é fundamental para desenvolvimeno de um diagnóstico sorológico mais eficiente para detecção do T. pallidum. O objetivo desse estudo foi a produção dos antígenos recombinantes para diagnóstico sorológico da sífilis. A seleção dos antígenos foi baseada em estudos proteômicos com auxílio dos programas de bioinformática. Três genes que codificam para as proteínas Tp0684, Tp0750 e Tp0792 foram selecionados e submetidos síntese química, clonados no vetor pAE; as proteínas foram expressas em E. coli BL21 StarTM e purificadas por cromatografia de afinidade. A antigenicidade das proteínas recombinantes rTp0684, rTp0750 e rTp0792 foram avaliadas através da técnica de Western blot e ELISA com soros de pacientes com sífilis primária (n = 6), sífilis latente (n = 34) e soros controles não infectados (n = 10). As três proteínas recombinantes foram reconhecidas pelos soros de pacientes com sífilis primária e sífilis latente nas técnicas Western blot e ELISA, demonstrando serem antigênicas. Estes resultados indicam que os antígenos produzidos têm potencial para serem utilizados no desenvolvimento de testes sorológicos para a triagem de pacientes com sífilis. Além disso, a estratégia de utilização de proteínas recombinantes pode garantir um incremento na especificidade dos testes sorológicos reduzindo a ocorrência de resultados falsos positivos. Por outro lado possibilita um estudo racional de alvos com alta sensibilidade, diminuindo de forma significativa resultados falsos negativos e positivos.
Abstract: The incidence of syphilis has increased alarmingly in recent decades, with an estimated 6 million new cases per year in the world. The diagnosis of syphilis remains a challenge, due to the difficulty of Treponema pallidum in vitro culture. In recent years, new treponemal tests have been developed using recombinant T. pallidum antigens. This approach confers greater specificity and sensitivity for the screening of patients with syphilis. This study aimed to the production of recombinant antigens for the development of a more efficient serological diagnosis for the detection of T. pallidum. The selection of antigens was based on proteomic studies with the aid of bioinformatics programs. Three genes coding for the Tp0684, Tp0750 and Tp0792 proteins were selected and submitted to chemical synthesis, cloned in the pAE vector; the proteins were expressed in E. coli BL21 Star™ and purified by affinity chromatography. The antigenicity of recombinant proteins rTp0684, rTp0750 and rTp0792 were evaluated by Western blot and ELISA with sera from patients with primary syphilis (n = 6), latent syphilis (n = 34) and uninfected control sera (n = 10). The three recombinant proteins were recognized by sera from patients with primary syphilis and latent syphilis in Western blot and ELISA, demonstrating be antigenic. These results indicate that the antigens produced have the potential to be used in the development of serological tests for the screening of patients with syphilis. In addition, the strategy of using recombinant proteins can ensure an increase in the specificity of serologic tests reducing the occurrence of false positive results. On the other hand, enables a rational study targets with high sensitivity, decreasing significantly negative and false positive results.
Palavras-chave: Treponema pallidum
Sífilis
Syphilis
Testes sorológicos
Serologic tests
Antígenos recombinantes
Recombinant antigens
CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal da Grande Dourados
Sigla da Instituição: UFGD
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
metadata.dc.publisher.program: Programa de pós-graduação em Biologia Geral/Bioprospecção
Citação: QUEIROZ,Júlio Henrique Ferreira de Sá. Estudo de proteínas antigênicas do Treponema pallidum. 2019. Dissertação (Mestrado em Biologia Geral/Bioprospecção) – Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2019.
Tipo de Acesso: Acesso Embargado
URI: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2300
Data do documento: 7-Mar-2019
Aparece nas coleções:Mestrado em Biologia Geral/Bioprospecção

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