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http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2788
Tipo: | Trabalho de Conclusão de Curso |
Título: | Microtubule based cytoskeleton for septin ring assembly during appressorium formation by the rice blast fungus |
Título(s) alternativo(s): | Microtubulos do citoesqueleto para a montagem do anel de septina durante a formação do apressório pelo patógeno da brusone |
Autor(es): | Del Corona, Fernanda de Pádua |
Primeiro Orientador: | Gavassoni, Walber Luiz |
metadata.dc.contributor.advisor-co1: | Egan, Martin |
metadata.dc.contributor.referee1: | Bacchi, Lilian Maria Arruda |
metadata.dc.contributor.referee2: | Souza, Paulo Henrique Nascimento de |
Resumo: | O fungo do brusone, Magnaporthe oryzae, é o patógeno da principal doença da cultura do arroz e o estudo do seu processo infeccioso deve ser uma prioridade para o desenvolvimento de novas estratégias de controle da doença. O objetivo deste trabalho é investigar a formação de apressórios no tubo germinativo de conídios de M. oryzae expostos ao benomil e o envolvimento dos microtubulos do citoesqueleto na montagem do anel de septina, essencial para que o processo infeccioso continue pela formação do peg de penetração. Para isto, o experimento foi desenvolvido no Departamento de Fitopatologia da University of Arkansas e utilizou conídios do mutante ∆Sep5-GFP de M. oryzae em sete tratamentos. Os conídios foram coletados em chamber slides, alocados em sete células com 2000 conídios/mL de concentração. Logo após, o fungicida benomil (5 μg/mL) foi aplicado com uma diferença de 2 horas, entre cada aplicação, ao longo de um período de 10 horas (0, 2, 4, 6, 8 e 10 horas), mais o tratamento controle com 0,5% de dimetilsulfóxido (DMSO), um solvente organossulfurado. As chamber slides foram mantidas durante a noite na incubadora, programada a 24oC e fotoperíodo de 12:12, após a última aplicação. No dia seguinte, os conídios foram visualizados no microscópio de visualização live-cell, com resolução de 200 vezes, e cinco fotos de cada tratamento foram tiradas. Os conjuntos de dados foram analisados por meio de regressão linear para examinar as relações entre o tempo de exposição ao fungicida e a formação de apressórios. A fim de confirmar ou não a montagem do anel de septina no apressório, também foram tiradas fotos epifluorescence dos tratamentos 0 horas, 10 horas e controle com resolução de 1000 vezes. Os resultados obtidos demonstraram que a formação de apressórios na extremidade dos tubos germinativos foram tanto menores quanto mais cedo ocorreu a exposição dos conídios ao benomil. Além disso, como a ação do benomil interrompe a mitose e depolimeriza os microtúbulos, a montagem do anel de septina foi somente visualizada no tratamento com DMSO. |
Abstract: | The rice blast fungus, Magnaporthe oryzae, causes the major destructive disease on worldwide rice production and understanding its infectious process must be a priority to develop new control strategies. The purpose of this work is to investigate the appressorium formation in germ tube of M. oryzae conidia and the involvement of the microtubule based cytoskeleton for septin ring assembly. For that purpose, the experiment was developed at the Department of Plant Pathology at the University of Arkansas and used conidia of the mutant ∆Sep5-GFP of M. oryzae in seven treatments. The conidia were collected into chamber slides, allocated into seven wells with 2000 conidia/mL concentration. Right after, the fungicide benomyl (5 μg/mL) was applied within a 2 hours difference, each, over a 10-hour period (0, 2, 4, 6, 8 and 10 hours), plus control with 0,5% of dimethyl sulfoxide (DMSO), an organosulfur compound. The chamber slides were kept overnight in an incubator, adjusted to 24oC and 12:12 light cycles, after the last benomyl application. On the following day, conidia were visualized on the live-cell imaging microcope with magnification of 200x and five frames of each treatment were taken. Data sets were analyzed using linear regression to examine the relationships between fungicide exposure time and apressoria formation. In order to the confirm or not the septin ring assembly in the appressoria, epifluorescence imaging were also taking from the 0 hours, 10 hours and DMSO treatment with magnification of 1000x. The results achieved demonstrated that germination and appressorial formation were lower in conidia at initials exposure times of the fungicide. Furthermore, as benomyl action interrupts mitosis and so depolymerizes microtubules, the septin ring assembly was only visualized in the DMSO treatment. |
Palavras-chave: | Magnaporthe oryzae Microtubo Microtubules Benomil Benomyl |
CNPq: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE |
Idioma: | eng |
País: | Brasil |
Editor: | Universidade Federal da Grande Dourados |
Sigla da Instituição: | UFGD |
metadata.dc.publisher.department: | Faculdade de Ciências Agrárias |
Citação: | DEL CORONA, Fernanda de Pádua. Microtubule based cytoskeleton for septin ring assembly during appressorium formation by the rice blast fungus. 2018. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Agronomia) – Faculdade de Ciências Agrárias, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2018. |
Tipo de Acesso: | Acesso Aberto |
URI: | http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/2788 |
Data do documento: | 6-Dez-2018 |
Aparece nas coleções: | Agronomia |
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