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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
Título: Padronização da técnica de reação em cadeia da polimerase para diagnóstico do Papilomavírus humano
Título(s) alternativo(s): Standardization technique of polymerase chain reaction for diagnosis of Human papillomavirus
Autor(es): Ortolani, Lais Gonçalves
Primeiro Orientador: Negrão, Fábio Juliano
Resumo: A infecção genital pelo papilomavírus humano (Human Papillomavims — HPV) é a mais frequente doença sexualmente transmissível (DST) na mulher e no homem. Existem mais de 200 tipos diferentes identificados de HPV, entre os quais mais de 100 estão completamente sequenciados geneticamente e mais de 120 com sequenciamento parcial. Os HPVs são classificados de acordo com a capacidade de alteração na regulação celular, sendo divididos em grupos de baixo, intermediário e alto risco. Os métodos usados na detecção do DNA do HPV em lesões valiam amplamente na sua sensibilidade e especificidade. Objetivos: Este trabalho teve por objetivo padronizar a técnica de reação em cadeia da polimerase - PCR, no laboratório de biologia molecular pertencente à Faculdade de Ciências da Saúde da Universidade Federal da Grande Dourados para o diagnóstico das papilomatoses humanas. Metodologia: A partir de amostras de mucosa oriundas do banco de amostras do Laboratório de Microbiologia Aplicada da Faculdade de Ciências da Saúde teve início os processos de extração e detecção do vírus pela técnica de reação em cadeia da polimerase. Para a extração do DNA foram testados três protocolos distintos, seguindo os protocolos indicados para DNAzoI Tm, TRIzol TM e extração MiniPrep . Elegeu-se a técnica de PCR com os pfimers MY09/MY1 e GH20/GH21. Os produtos da PCR foram submetidos à eletroforese em gel de agarose a 3% e os fragmentos foram visualizados sob luz ultravioleta (UV) no transluminador. Resultados: Das quatro amostras analisadas, todas amplificaram o gene controle da I3-globina humana Assim, a análise da presença do DNA do HPV foi efetuada em todas as amostras, que foram submetidas à técnica de PCR e se mostraram positivas.
Abstract: The genital infection by the human papillomavims (Human Papillomavirus-HPV) is the most common sexually transmitted disease (STD) in women and in men. There are mom than 200 different types of HPV identified, among whom more than 100 are completely genetically sequenced and more than 120 with partial sequencing. The Hpv am classified according to the ability to change in cellular regulation, being divided into groups of low, intermediate and high risk. The methods used in the detection of HPV DNA in injuries vary widely in their sensitivity and specificity. Objectives: This study aimed to standardize the technique polymerase chain reaction-PCR, in the laboratory of molecular biology in the Faculdade de Ciencias da Satide of the Universidade Federal da Grande Dourados for diagnosis of Papillomatosis. Methodology: from mucous samples from the samples of Applied Microbiology Laboratory of the Faculdade de Ciencias da Satide began the detection and extraction processes processes of extraction and detection of viruses by polymerase chain reaction. For the extraction of DNA were tested three different protocols, following popular protocols for DNAzoI Tm, TRIzol -114 and extraction MiniPrep. Was elected the technique the PCR with the primers, MY09/MY I land GH20/GH21. The PCR products were subjected to electrophoresis in 3% agarose gel and fragments were visualized under ultraviolet light (UV) in transluminator. Results: of the four samples analyzed, all amplified the gene control of human 13-globin. Thus, the analysis of the presence of HPV DNA was made on all samples, who underwent PCR and were positive.
Palavras-chave: Reação em Cadeia da Polimerase
Polymerase Chain Reaction
Papiloma
CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal da Grande Dourados
Sigla da Instituição: UFGD
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
Citação: ORTOLANI, Lais Gonçalves. Padronização da técnica de reação em cadeia da polimerase para diagnóstico do Papilomavírus humano. 2013. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Ciências Biológicas) – Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2013.
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/4427
Data do documento: 2013
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