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metadata.dc.type: Tese
Title: Avaliação das propriedades antioxidante e anticâncer do extrato aquoso da casca do caule de Stryphnodendron adstringens
Other Titles: Evaluation of in vitro antioxidant and anticancer properties of the aqueous extract from the stem bark of Stryphnodendron adstringens
metadata.dc.creator: Baldivia, Debora da Silva
metadata.dc.contributor.advisor1: Santos, Edson Lucas dos
metadata.dc.contributor.referee1: Carvalho Junior, José Tarcisio Giffoni de
metadata.dc.contributor.referee2: Paredes-Gamero, Edgar Julian
metadata.dc.contributor.referee3: Oliveira, Caio Fernando Ramalho de
metadata.dc.contributor.referee4: Santos, Uilson Pereira dos
metadata.dc.description.resumo: Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae) é uma árvore nativa do Cerrado brasileiro conhecida popularmente como barbatimão ou casca-damocidade. Na medicina popular, a decocção ou infusão das cascas do caule desta planta são utilizadas no tratamento de várias doenças. Neste estudo, o objetivo foi investigar a composição química do extrato aquoso das cascas do caule de Stryphnodendron adstringens (EASA), avaliar as propriedades antioxidante e anticâncer, bem como caracterizar os mecanismos de morte promovidos contra células de melanoma murino B16F10Nex-2. Cascas do caule de Stryphnodendron adstringens foram coletadas no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil, e em seguida maceradas com água destilada durante 48 horas para obtenção do extrato aquoso, EASA. A identificação dos constituintes químicos foi determinada por LC-DAD-MS e a quantificação dos compostos fenólicos e flavonoides foi determinada por ensaios colorimétricos. A atividade antioxidante do EASA foi investigada pelos métodos de captura dos radicais 2,2’- azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfônico) (ABTS) e 2,2-difenil-1-picrilhidrazila (DPPH), inibição da hemólise oxidativa e inibição da peroxidação lipídica induzida por 2,2’- azobis (2-amidinopropano) (AAPH) em eritrócitos humanos. Células de melanoma murinho B16F10Nex-2 foram utilizadas para avaliar a ação anticâncer e os mecanismos envolvidos na morte celular promovida pelo EASA. Foram identificados no EASA ácido gálico, galocatequina, epigalocatequina, cromonas isoméricas C-hexosil O-pentosil 5,7-dihidroxicromona e proantocianidinas dimérica e trimérica composta principalmente por unidades de prodelfidina. As concentrações de compostos fenólicos foram 197,10 ± 0,83 mg EAG/g de EASA e para flavonoides foram 2,87 ± 0,08 mg EQ/g. A capacidade antioxidante pelo ensaio de ABTS demonstrou que o EASA foi capaz de inibir 50 % dos radicais livres (IC50) na concentração de 1,83 ± 0,15 μg/mL e inibição máxima dos radicais livres em 99,68 ± 0,08 % na concentração de 10 μg/mL. No ensaio de DPPH o EASA apresentou IC50 na concentração de 3,81 ± 0,02 μg/mL e inibição máxima em 89,92 ± 1,36 % na concentração de 50 μg/mL. Estes resultados corroboram com os obtidos no ensaio de AAPH, onde o EASA apresentou atividade anti-hemolítica e diminuição do conteúdo de malondialdeído em eritrócitos humanos ao longo de todo período experimental (240 min) de forma concentração e tempo dependente. Na avaliação de citotoxicidade, o EASA apresentou ação citotóxica contra as células do melanoma B16F10Nex-2 na concentração de 65 μg/mL após o tratamento de 24 e 48 h, sendo o perfil de morte celular observado a apoptose tardia. A investigação dos mecanismos de morte celular promovido pelo EASA evidenciou aumento dos níveis de ERO intracelular, disfunção do potencial de membrana mitocondrial e ativação da caspase-3. Em conjunto, estes dados mostram atividades antioxidantes e anticâncer do extrato aquoso das cascas do caule de Stryphnodendron adstringens, resultados que abrem novas perspectivas para investigações contra outras linhagens de células tumorais, modelos in vivo, bem como para a identificação e isolamento dos constituintes químicos responsáveis por estes efeitos.
Abstract: Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (Fabaceae) is a tree species native to the Brazilian Cerrado, commonly known as barbatimão or casca-da-mocidade. In traditional medicine, decoctions or infusions of the stem bark of this plant are used in the treatment of several diseases. The objective of this study was to investigate the chemical composition of the aqueous extract of the stem bark of Stryphnodendron adstringens (EASA), to evaluate the antioxidant and anticancer properties, as well as to characterize the mechanisms of death promoted against B16F10Nex-2 murine melanoma cells. Stryphnodendron stem bark were collected in the State of Mato Grosso do Sul, Brazil, and then macerated with distilled water for 48 hours to obtain the aqueous extract, SAAE. Identification of the chemical constituents was determined by LC-DAD-MS and the quantification of phenolic compounds and flavonoids present in the SAAE were determined by the colorimetric methods FolinCiocalteau and aluminum chloride, respectively. The antioxidant activity of SAAE was investigated using the monocation of 2,2'-azinobis- (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) and 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radicals, inhibition of oxidative hemolysis and inhibition of lipid peroxidation induced by 2,2'-azobis (2- amidinopropane) (AAPH) in human erythrocytes. B16F10Nex-2 murine melanoma cells were used to evaluate the anticancer action and mechanisms involved in the cell death promoted by the SAAE. From the SAAE, gallic acid, gallocatechin, epigallocatechin, isomeric chromones C-hexosyl- and O-pentosyl-5,7- dihydroxychromone, dimeric and trimeric proanthocyanidins mainly composed of prodelphidin units and the were identified. The concentrations of phenolic compounds were 197.10 ± 0.83 mg EAG / g SAAE and for flavonoids were 2.87 ± 0.08 mg EQ / g. The antioxidant capacity by the ABTS assay demonstrated that SAAE was able to inhibit 50% of the radicals (IC50) at a concentration of 1.83 ± 0.15 μg / mL and maximal inhibition of free radicals of 99.68 ± 0.08% at the concentration of 10 μg / mL. In the DPPH assay, SAAE presented IC50 at the concentration of 3.81 ± 0.02 μg / mL and maximum inhibition of 89.92 ± 1.36% at the concentration of 50 μg / mL. These results corroborate with those obtained in the AAPH assay, where SAAE showed anti-hemolytic action activity and decreased malondialdehyde content in human erythrocytes throughout the experimental period (240 min) in concentration and time dependent manner. In the evaluation of cytotoxicity, the presented cytotoxic action against the B16F10Nex-2 melanoma cells at the concentration of 65 μg / mL after the treatment of 24 and 48 h, the observed cell death profile being the late apoptosis. The investigation of the mechanisms of cell death promoted by showed an increase in intracellular ROS levels, dysfunction of the mitochondrial membrane potential and activation of caspase-3. Together, these data show antioxidant and anticancer effects of the aqueous extract from the stem bark of Stryphnodendron astringens, results that open new perspectives for investigations against other tumor cell lines, in vivo models, as well as for the identification and isolation of the responsible chemical constituents for these purposes.
Keywords: Cerrado - flora
Plantas medicinais
Medicinal plants
Estresse oxidativo
Oxidative stress
Apoptose
Apoptosis
Melanoma
Melanoma
metadata.dc.subject.cnpq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS
metadata.dc.language: por
metadata.dc.publisher.country: Brasil
Publisher: Universidade Federal da Grande Dourados
metadata.dc.publisher.initials: UFGD
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
metadata.dc.publisher.program: Programa de pós-graduação em Biotecnologia e Biodiversidade
Citation: BALDIVIA, Debora da Silva. Avaliação das propriedades antioxidante e anticâncer do extrato aquoso da casca do caule de Stryphnodendron adstringens. 2018. 88 f. Tese (Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade) – Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2018.
metadata.dc.rights: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/502
Issue Date: 13-Aug-2018
Appears in Collections:Doutorado em Biotecnologia e Biodiversidade

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