Use este identificador para citar ou linkar para este item:
http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/557
Tipo: | Dissertação |
Título: | Epidemiologia molecular de enterobactérias resistentes a carbapenêmicos |
Autor(es): | Silva, Kesia Esther da |
Primeiro Orientador: | Simionatto, Simone |
metadata.dc.contributor.advisor-co1: | Gales, Ana Cristina |
Resumo: | Enterobactérias produtoras de β-lactamases de espectro estendido (ESBL) e carbapenemases continuam a ser a principal causa de resistência a antibióticos β-lactâmicos e, potencialmente, um grave problema de saúde global. Este estudo foi realizado para avaliar a susceptibilidade antimicrobiana e a epidemiologia molecular de cepas de Klebsiella sp. e Serratia sp. resistentes a carbapenêmicos isoladas de um hospital público de Dourados/MS. Durante Maio/2011 a Maio/2013, foram isoladas 30 cepas de Serratia marcescens e 68 cepas de Klebsiella pneumoniae com perfil de resistência ou intermediário às cefalosporinas de terceira geração. A identificação das espécies foi realizada com o sistema automatizado Vitek- 2 e confirmado pelo sistema Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS). Todas as cepas apresentaram resistências à carbapenêmicos pela técnica de concentração inibitória mínima (CIM). A produção de carbapenemases pelo Teste Modificado de Hodge (MHT) foi detectada em 67 cepas de K. pneumoniae e 24 de S. marcescens. No entanto, a hidrólise de carbapenêmicos por MALDI TOF MS foi detectada em 57 de K. pneumoniae e em 24 de S. marcescens. O gene blaKPC-2 foi identificado em 24 S. marcescens resistentes a carbapenêmicos e, entre elas o gene blaIMP-10 foi também observado em seis cepas. A presença dos genes blaTEM e blaSHV foi evidenciada em seis cepas de S. marcescens negativas para o blaKPC-2. Os experimentos de conjugação e hibridação mostraram que o gene blaKPC-2 estava inserido em plasmídeos conjugativos, enquanto o gene blaIMP-10 estava inserido em um integron de classe 1, com a presença de dois genes inseridos em cassetes, aac(6’)-IIc e aad1. Todas as cepas de S. marcescens produtoras de KPC mostraram similaridade genética pelo PFGE. A amplificação por PCR e o sequenciamento mostrou que o gene blaKPC-2 estava presente em 57 K. pneumoniae resistentes a carbapenêmicos. O gene blaKPC-2 não foi encontrado em 11 cepas, porém foi observada a presença dos genes blaCTX–M-1-like, blaCTX–M-2-like, blaCTX-M-8 like, blaCTX-M-14-like, blaSHV-like e alteração das proteínas OmpK35 e OmpK36. As K. pneumoniae produtoras de KPC demonstraram alta similaridade genética na análise pelo PFGE. Para identificar os fatores de risco para K. pneumoniae produtora de KPC, foi realizado um estudo caso-controle com 94 patients (47 casos e 47 controles). Na análise multivariada, tempo de internação prolongado, cirurgia prévia, ventilação mecânica, cateter venoso central e cateter urinário, foram associados com K. pneumoniae produtoras de KPC. Os resultados indicam a disseminação de Enterobactérias produtoras de beta-lactamases em um hospital público de Dourados/Mato Grosso do Sul e a primeira descrição de cepas de S. marcescens co-produtoras de KPC-2 e IMP-10. Portanto, compreender a extenção do reservatório nas unidades de saúde pode ser importante para a intervenção direcionada e redução das infecções hospitalares. |
Abstract: | Enterobacteriaceae producing β-lactamases extended spectrum (ESBL) and carbapenemases continue to be the leading cause of resistance to β-lactam antibiotics and, potentially a major global health problem. This study was carried out to assess antimicrobial susceptibilities and molecular epidemiology of β-lactamases-producing Serratia sp. and Klebsiella sp. strains isolated in a public hospital in Dourados/MS. During May/2011 to May/2013, 30 Serratia marcescens and 68 Klebsiella pneumoniae strains with resistance or intermediate profile to third-generation cephalosporins were recovered. Species identification was performed with Vitek-2 automatized system and confirmed by Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry (MALDI-TOF MS). All strains showed resistances to carbapenem by minimum inhibitory concentration (MIC). Carbapenemase production by Modified Hodge Test (MHT) was detected in 67 K. pneumoniae and 24 S. marcescens strains. However, carbapenem hydrolysis by MALDI-TOF MS was detected in 57 K. pneumoniae and 24 S. marcescens. The blaKPC-2 gene was present in 24 carbapenem-resistant S. marcescens and among them the blaIMP-10 gene was also observed in six strains. The presence of blaTEM-like and blaSHV-like genes was evidenced in six S. marcescens negative to blaKPC-2. The conjugation experiments and hybridization showed that blaKPC-2 gene was inserted into conjugative plasmids while blaIMP-10 gene, was inserted into a class 1 integron with the presence of two inserted gene cassette, aac(6’)-IIc and aad1. All KPC-producing S. marcenscens strains showed the same PFGE patters. PCR amplification and sequencing showed that the blaKPC-2 gene was present in 57 carbapenem-resistant K. pneumoniae. The blaKPC-2 gene was not found in 11 strains. However, the presence of blaCTX– M-1-like, blaCTX–M-2-like, blaCTX-M-8 like, blaCTX-M-14-like, blaSHV-like genes and altered OmpK35 and OmpK36 proteins, were observed. The KPC-producing K. pneumoniae showed high genetic similarity in PFGE analysis. To identify risk factors for KPC-producing K. pneumoniae, a case-control study was conducted with 94 patients (47 cases and 47 controls). Longer hospitalizations, previous surgery, use of mechanical ventilation, central venous catheter and urinary catheter were associated with KPC-producing K. pneumoniae in the multivariable analysis. The results indicate the spread of β-lactamases-producing Enterobacteriaceae in a public hospital in Dourados Mato Grosso do Sul and the first report of KPC-2 and IMP-10 co producing S. marcescens strains. Therefore, understanding the extent of the reservoir in healthcare facilities may be important for targeted intervention and reduction of hospital infections. |
Palavras-chave: | Enterobacteriaceae beta-Lactamases Tipagem molecular Molecular typing |
CNPq: | CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE |
Idioma: | por |
País: | Brasil |
Editor: | Universidade Federal da Grande Dourados |
Sigla da Instituição: | UFGD |
metadata.dc.publisher.department: | Faculdade de Ciências da Saúde |
metadata.dc.publisher.program: | Programa de pós-graduação em Ciências da Saúde |
Citação: | SILVA, Kesia Esther da. Epidemiologia molecular de enterobactérias resistentes a carbapenêmicos. 2014. 88 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) – Faculdade de Ciências da Saúde, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2014. |
Tipo de Acesso: | Acesso Aberto |
URI: | http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/557 |
Data do documento: | 2014 |
Aparece nas coleções: | Mestrado em Ciências da Saúde |
Arquivos associados a este item:
Arquivo | Descrição | Tamanho | Formato | |
---|---|---|---|---|
KesiaEstherdaSilva.pdf | 1,36 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |
Os itens no repositório estão protegidos por copyright, com todos os direitos reservados, salvo quando é indicado o contrário.