Potencial citotóxico de Tillandsia recurvata (L.) L. em células de melanoma

Abstract

Melanoma skin cancer is highly aggressive and has a high mortality rate. This type of cancer is characterized by uncontrolled cell proliferation of elanocytes with high metastatic capacity. Conventional chemotherapy and radiotherapy treatments have limited effectiveness and adverse effects. In this context, natural products have been a source of active molecules for the development of new anticancer drugs. In this study, we highlight the plant species Tillandsia recurvata, an epiphytic plant capable of adapting to different stressful environmental situations. Several studies have highlighted the anticancer potential of this plant, especially for its antiproliferative, cytotoxic and antiangiogenic effects. In this context, the aim of this study was to investigate the cytotoxic activity of T. recurvata on melanoma cells. For this, using solvent-accelerated extraction, four extracts of T. recurvata were prepared using subsequently organic solvents of different polarities: hexane, dichloromethane:methanol (95:5 and 1:1, v/v), and ethanol :H2O (7:3 v/v), obtaining the extracts EHTR, E95:5TR, E1:1TR and EETR, respectively. Then, B16F10-Nex2 murine melanoma cells were treated with different concentrations of extracts, 12.5-200 μg/mL, and submitted to cell viability assay using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2 ,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). The results were used to calculate the 50% inhibitory concentration (IC50) of B16F10-Nex2 cells by the extracts. The main results show IC50 of 14.49 ± 1.99 and 14.83 ± 2.33 μg/mL for E95:5TR after 24 and 48h, respectively; and 176.41 ± 21.84 at 24 h only for E1:1TR. At the highest concentration evaluated, 200 µg/ml, E95:5TR promoted about 76% of the death of B16F10-Nex2 cells. Regarding morphology, B16F10-Nex2 cells showed cellular pleomorphism resulting from treatments with the different extracts. Taken together, the results obtained in this study show, for the first time, the cytotoxic action of dichloromethane:methanol extracts from T. recurvata in a highly aggressive melanoma cell line, with great metastatic potential, opening promising perspectives for future studies.

El cáncer de piel tipo melanoma es muy agresivo y tiene una alta tasa de mortalidad. Este tipo de cáncer se caracteriza por una proliferación celular descontrolada de melanocitos con alta capacidad metastásica. Los tratamientos convencionales de quimioterapia y radioterapia tienen una efectividad y efectos adversos limitados. En este contexto, los productos naturales han sido una fuente de moléculas activas para el desarrollo de nuevos fármacos anticancerígenos. En este estudio destacamos la especie vegetal Tillandsia recurvata, una planta epífita capaz de adaptarse a diferentes situaciones ambientales estresantes. Varios estudios han destacado el potencial anticancerígeno de esta planta, especialmente por sus efectos antiproliferativos, citotóxicos y antiangiogénicos. En este contexto, el objetivo de este estudio fue investigar la actividad citotóxica de T. recurvata en células de melanoma. Para ello, mediante extracción acelerada por solventes, se prepararon cuatro extractos de T. recurvata utilizando posteriormente solventes orgánicos de diferentes polaridades: hexano, diclorometano:metanol (95:5 y 1:1, v/v), y etanol :H2O (7 :3 v/v), obteniendo los extractos EHTR, E95:5TR, E1:1TR y EETR, respectivamente. Luego, las células de melanoma murino B16F10-Nex2 se trataron con diferentes concentraciones de extractos, 12.5-200 μg/mL, y se sometieron a un ensayo de viabilidad celular usando bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio. (MTT). Los resultados se usaron para calcular la concentración inhibidora del 50% (IC50) de las células B16F10-Nex2 por los extractos. Los principales resultados muestran IC50 de 14,49 ± 1,99 y 14,83 ± 2,33 μg/mL para E95:5TR a las 24 y 48 h, respectivamente; y 176,41 ± 21,84 a las 24 h solo para E1:1TR. A la concentración más alta evaluada, 200 µg/ml, E95:5TR promovió aproximadamente el 76 % de la muerte de las células B16F10-Nex2. En cuanto a la morfología, las células B16F10- Nex2 presentaron pleomorfismo celular resultante de los tratamientos con los diferentes extractos. En conjunto, los resultados obtenidos en este estudio muestran, por primera vez, la acción citotóxica de los extractos de diclorometano:metanol de T. recurvata en una línea celular de melanoma altamente agresiva, con gran potencial metastásico, abriendo perspectivas prometedoras para futuros estudios.