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Tipo: Dissertação
Título: Potencial anti-Candida albicans dos extratos etanólico e aquoso das folhas de Bauhinia holophylla (Bong.) Steud
Autor(es): Rosa, Stéfani de Oliveira
Primeiro Orientador: Oliveira, Kelly Mari Pires de
metadata.dc.contributor.referee1: Apolonio, Adriana Araújo de Almeida
metadata.dc.contributor.referee2: Cardoso, Claudia Andrea Lima
Resumo: A candidíase oral é uma infecção fúngica causada principalmente por Candida albicans, considerada um problema de saúde pública que afeta grande parte da população. Candida albicans habita comensalmente a microbiota normal humana, entretanto, o desequilíbrio do organismo hospedeiro pode causar a transição do estágio comensal para patogênico. Aliado a isso, a terapia tópica desta infecção é restrita ao uso dos antifúngicos gluconato de clorexidina e nistatina, porém, estes apresentam efeitos citotóxicos e adversos associados. Diante da necessidade de suprir a limitada terapia antifúngica, as plantas medicinais configuram-se como uma rica possibilidade para o desenvolvimento de agentes antifúngicos capazes de atuar no tratamento de candidíase oral. Bauhinia holophylla Bong. Steud. conhecida como “pata-de-vaca” pertence à família Fabaceae e é popularmente utilizada para tratar infecções e processos inflamatórios, no entanto, seu potencial antifúngico ainda é pouco elucidado. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivo avaliar a composição química e atividade antifúngica dos extratos etanólico e aquoso de Bauhinia holophylla (Bong.) Steud. frente Candida albicans. Os extratos foram submetidos a análise por varredura na região ultravioleta (UV/Vis), análise qualitativa de metabólitos secundários e Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência com detector de arranjo de diodos. A atividade antifúngica de EEB e EAB foi determinada pela técnica de microdiluição em caldo, assim como, os mecanismos de ação via sorbitol e via ergosterol. O método de Checkerboard foi utilizado para determinar a combinação dos extratos com gluconato de clorexidina, nistatina e fluconazol. A cinética de crescimento foi realizada pelo método de contagem de células viáveis expressas em células/mL. A formação de tubos germinativos foi avaliada por contagem em câmara de Neubauer em microscópio óptico. A atividade antibiofilme foi determinada por contagem de células viáveis e método XTT. Por fim, a atividade hemolítica foi avaliada em eritrócitos humanos e quantificada em espectrofotômetro Os resultados obtidos indicaram a presença de ácido protocatecuico, epicatequina e rutina nos dois extratos. EEB apresentou atividade antifúngica com CIM de 15,68 µg/mL e EAB 31,25 µg/mL frente C. albicans ATCC 90028, ATCC 10231 e frente aos seis isolados orais CIM entre 7,8 – 62,5 µg/mL. Os ensaios de mecanismos de ação sugerem que possivelmente EEB e EAB se ligam ao ergosterol presente na membrana celular fúngica. EEB apresentou efeito sinérgico com gluconato de clorexidina, nistatina e fluconazol e EAB com nistatina e fluconazol. No ensaio de cinética de crescimento, os tratamentos com EEB e fluconazol exibiram redução semelhante. Os extratos não apresentaram atividade sobre a formação e destruição de biofilmes. Na formação de tubo germinativo por C. albicans, EEB e EAB apresentaram uma porcentagem de redução de germinação de 29% e 31%, respectivamente, e o fluconazol de 24%. Ambos os extratos não apresentaram percentual hemolítico em eritrócitos humanos. Os resultados encontrados indicam o potencial dos extratos de B. holophylla no controle da candidíase oral, destacando sua possível utilidade como alternativa terapêutica.
Abstract: Oral candidiasis is a fungal infection caused mainly by Candida albicans, considered a public health problem that affects a large part of the population. Candida albicans inhabits the normal human microbiota commensally, however, an imbalance in the host organism can cause a transition from the commensal to the pathogenic stage. In addition, topical therapy for this infection is restricted to the use of the antifungals chlorhexidine gluconate and nystatin, but these have associated cytotoxic and adverse effects. Faced with the need to supply limited antifungal therapy, medicinal plants are a rich possibility for the development of antifungal agents capable of acting in the treatment of oral candidiasis. Bauhinia holophylla Bong. Steud. known as "pata-de-vaca" belongs to the Fabaceae family and is popularly used to treat infections and inflammatory processes, however, its antifungal potential is still poorly understood. The aim of this study was therefore to evaluate the chemical composition and antifungal activity of the ethanolic and aqueous extracts of Bauhinia holophylla (Bong.) Steud. against Candida albicans. The extracts were subjected to scanning analysis in the ultraviolet region (UV/Vis), qualitative analysis of secondary metabolites and Ultra Efficiency Liquid Chromatography with a diode array detector. The antifungal activity of EEB and AEB was determined using the broth microdilution technique, as well as the mechanisms of action via sorbitol and ergosterol. The Checkerboard method was used to determine the combination of extracts with chlorhexidine gluconate, nystatin and fluconazole. Growth kinetics were performed using the viable cell counting method expressed in cells/mL. The formation of germ tubes was evaluated by counting in a Neubauer chamber under an optical microscope. Antibiofilm activity was determined by viable cell counting and the XTT method. Finally, hemolytic activity was evaluated in human erythrocytes and quantified using a spectrophotometer. The results showed the presence of protocatechuic acid, epicatechin and rutin in both extracts. EEB showed antifungal activity with MIC of 15.68 µg/mL and AEB 31.25 µg/mL against C. albicans ATCC 90028, ATCC 10231 and against the six oral isolates with MIC between 7.8 – 62.5 µg/mL. The sorbitol and exogenous ergosterol assays suggest that EEB and EAB possibly bind to the ergosterol present in the fungal cell membrane. EEB showed a synergistic effect with chlorhexidine gluconate, nystatin and fluconazole and AEB with nystatin and fluconazole. In the growth kinetics assay, treatments with EEB and fluconazole exhibited a similar reduction. The extracts did not show activity on the formation and destruction of biofilms. In the formation of germ tube by C. albicans, EEB, AEB showed a percentage reduction in germination of 29% and 31%, respectively, and fluconazole of 24%. Both extracts did not show a hemolytic percentage in human erythrocytes. The results found showed promising activities of the extracts from the perspective of controlling C. albicans, especially with regard to oral candidiasis.
Palavras-chave: Candida albicans
Candida albicans
Patógeno oral
Oral pathogen
Atividade antifúngica
Antifungal activity
CNPq: CNPQ::CIENCIAS DA SAUDE
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal da Grande Dourados
Sigla da Instituição: UFGD
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências da Saúde
metadata.dc.publisher.program: Programa de pós-graduação em Ciências da Saúde
Citação: ROSA, Stéfani de Oliveira. Potencial anti-Candida albicans dos extratos etanólico e aquoso das folhas de Bauhinia holophylla (Bong.) Steud. 2024. 28 f. Dissertação (Mestrado em Ciências da Saúde) – Faculdade de Ciências da Saúde, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2024.
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/6433
Data do documento: 7-Mar-2024
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