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Tipo: Trabalho de Conclusão de Curso
Título: Identificação molecular de Treponema pallidum
Título(s) alternativo(s): Molecular identification of Treponema pallidum
Autor(es): Ferreira, Tiago da Silva
Primeiro Orientador: Simionatto, Simone
metadata.dc.contributor.advisor-co1: Queiroz, Júlio Henrique Ferreira de Sá
metadata.dc.contributor.referee1: Barbosa, Marcelo do Santos
metadata.dc.contributor.referee2: Rossato, Luana
Resumo: A sífilis é causada pelo Treponema pallidum subespécie pallidum, uma infecção sexualmente transmissível (IST) com amplo espectro de manifestação clínica, que varia de acordo com os estágios da infecção e o estado imunológico do hospedeiro. A sífilis apresenta fases sintomáticas distintas (primária, secundária e terciária) e períodos de latência (sífilis latente recente e tardia) podendo ocorrer lesões aguda e crônica até a forma disseminada com complicações neurológicas. O seu diagnóstico é baseado em sintomas clínicos associados aos testes sorológicos. A técnica da subtipagem molecular é uma ferramenta robusta para investigar a diversidade e epidemiologia do T. pallidum. Este estudo teve como objetivo caracterizar o T. pallidum isolado de um paciente com sífilis primária pelo método Enhanced Centers for Disease Control and Prevention typing (ECDCT), esse método consiste em: 1) Determinação do número de 60 pb que repete no gene arp 2) RFLP (Polimorfismo no Comprimento de Fragmentos de Restrição) dos genes tpr de subfamília II (tpr EGJ); 3) Análise da região de 84 pb do gene tp0548. A sífilis primária foi diagnosticada pela combinação de sintomas clínicos (presença de uma lesão indolor), com o teste rápido de sífilis (ABON Biopharm, Hangzhou, China) e o teste Venereal Disease Research Laboratory (Abbott Murex, Dartford, UK). O DNA treponêmico foi identificado na lesão através da Reação em Cadeia da Polimerase utilizando como alvo o gene polA, mas não foi possível a identificação do DNA do T. pallidum na amostra de sangue total. A sequência do fragmento do gene arp apresentou 14 repetições, sendo relatado como mais prevalente no mundo. Na análise da região do gene tp0548 apresentou similaridade ao subtipo g, que o qual é o mais prevalente em alguns países europeus. A cepa isolada apresentou o subtipo parcial 14 x/g. A técnica da PCR vem sendo utilizada como uma técnica sensível e específica para a identificação do DNA de T. pallidum em amostras clínicas. O método de subtipagem demonstra relevância biológica e clínica na investigação e discriminação de reinfecções assim como na identificação geográfica.
Abstract: Syphilis is caused by Treponema pallidum subspecies pallidum, a sexually transmitted infection (STI) with a broad spectrum of clinical manifestations, which varies according to the stages of infection and the host's immune status. Syphilis presents distinct symptomatic phases (primary, secondary and tertiary) and latency periods (recent and late latent syphilis), with acute and chronic lesions occurring to the disseminated form with neurological complications. Its diagnosis is based on clinical symptoms associated with serological tests. The molecular subtyping technique is a robust tool to investigate the diversity and epidemiology of T. pallidum. This study aimed to characterize T. pallidum isolated from a patient with primary syphilis using the Enhanced Centers for Disease Control and Prevention typing (ECDCT) method, this method consists of: 1) Determining the 60 bp number that repeats in the arp 2 gene ) RFLP (Polymorphism in Length of Restriction Fragments) of the subpramily II tpr genes (tpr EGJ); 3) Analysis of the 84 bp region of the tp0548 gene. Primary syphilis was diagnosed by combining clinical symptoms (presence of a painless lesion), with the rapid syphilis test (ABON Biopharm, Hangzhou, China) and the Venereal Disease Research Laboratory test (Abbott Murex, Dartford, UK). Treponemic DNA was identified in the lesion through the Polymerase Chain Reaction using the polA gene as a target, but it was not possible to identify T. pallidum DNA in the whole blood sample. The sequence of the arp gene fragment showed 14 repetitions, being reported as the most prevalent in the world. In the analysis of the tp0548 gene region, it was similar to subtype g, which is the most prevalent in some European countries. The isolated strain had a partial subtype 14 x / g. The PCR technique has been used as a sensitive and specific technique for the identification of T. pallidum DNA in clinical samples. The subtyping method demonstrates biological and clinical relevance in the investigation and discrimination of reinfections as well as in geographical identification.
Palavras-chave: Doenças sexualmente transmissíveis
Sexually transmitted diseases
Tipagem molecular
Molecular typing
Reação em cadeia da polimerase
Polymerase chain reaction
CNPq: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::GENETICA::GENETICA MOLECULAR E DE MICROORGANISMOS
Idioma: por
País: Brasil
Editor: Universidade Federal da Grande Dourados
Sigla da Instituição: UFGD
metadata.dc.publisher.department: Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais
Citação: FERREIRA, Tiago da Silva. Identificação molecular de Treponema pallidum. 2020. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Ciências Biológicas) – Faculdade de Ciências Biológicas e Ambientais, Universidade Federal da Grande Dourados, Dourados, MS, 2020.
Tipo de Acesso: Acesso Aberto
URI: http://repositorio.ufgd.edu.br/jspui/handle/prefix/4776
Data do documento: 9-Nov-2020
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